抗體-藥物偶聯(lián)物即ADC是一類生物制藥藥物，是通過化學鏈將具有生物活性的小分子藥物連接到抗體上，抗體作為載體將小分子藥物靶向運輸到目標細胞中被設計用于治療癌癥的靶向療法。與化學療法不同，ADC 旨在靶向并殺死腫瘤細胞，同時保留健康細胞。類似的還有新興的AOC（抗體-寡核苷酸偶聯(lián)物）基因治療技術。

NanoPhotometer®超微量分光光度計作為標準的紫外-可見法分析設備，已廣泛的應用于包括ADC在內的單抗、雙抗的定量。同時，設備的多波長/全波長測量功能，能夠同時測量抗體及偶聯(lián)物的吸光值和濃度。這使測量藥物抗體比（DAR）變得十分方便。DAR能明顯影響ADC藥物的毒性。如DAR過低，則抗體攜帶的效率較低；反之，如DAR 過高，機體易將其識別為異物從而快速清除。DAR的異質性也可能導致毒性的不確定，造成毒性脫靶。

應用程序1  UV法蛋白定量

標準的UV法蛋白定量模塊，提供基于消光系數法的蛋白濃度測量，測量主波長默認為280nm，同時也可根據抗體樣品實際的最大吸收波長進行設置。對于空載抗體的定量，通常使用默認的UV280法，并使用默認的320nm背景校正。當測量ADC樣品時，由于偶聯(lián)藥物的吸收峰通常出現(xiàn)在300-400nm之間，并于抗體之間有連續(xù)的紫外吸收，因此建議關閉背景校正功能（對于澄清樣品），以獲得準確的吸光值/濃度。在此模式下，如想在獲得抗體濃度的同時，也測量偶聯(lián)物的吸光值，可點擊光譜曲線，可選擇查看任意波長下的吸光值，找到對應的偶聯(lián)物的最大吸收波長和吸光值即可。

應用程序2  多波長測量

在分析化學應用界面中，選擇單/多波長測量模塊，根據抗體和偶聯(lián)物的最大吸收波長，進行測量波長設置，并進行背景校正波長設置（可根據需要設置在可見光/近紅外波長區(qū)域）。測量結果可直接顯示抗體和偶聯(lián)物的吸光值，并輸出為報告。

應用程序3  比值測量

核酸樣品的A260/A280、A260/A230比值是大家熟知的，而對于其他樣品而言，吸光值比值測量模塊可支持自定義的雙波長下吸光值比值的計算。如抗體測量A280值，偶聯(lián)物測量A378，則可得到兩個波長的吸光值和比值結果，并輸出為報告。

ADC樣品測量的良好實踐：

1. 可使用N60/NP80的混勻器進行5-10秒的樣品充分混勻

2. 基于測量目的，選擇對應的應用程序

3. 正確設置背景校正波長，這非常重要

4. 正確的清潔，高濃度或高粘度樣品建議進行空白回測

NanoPhotometer®還可配置符合GxP及《藥品數據管理規(guī)范》要求的合規(guī)性軟件，具有多層級用戶管理、電子記錄和電子簽名、審計追蹤和接入控制等功能，滿足客戶的合規(guī)性流程需要，在包括ADC在內的生物制藥工藝開發(fā)、中試、生產、質控中具有廣泛的使用場景和用戶基礎。

* 本文轉載自「Implen超微量分光光度計」公眾號